“一种人心肌肌钙蛋白 I适配子及筛选方法和应用”发明专利审查意见答复案例
专利号：201210227783.8
申请人单位：天津科技大学
代理人：韩晓梅
案情简介
本发明涉及一种人心肌肌钙蛋白I适配子，具有序列表中SEQ ID No.1所述的核苷酸序列或具有序列表中SEQ ID No.2所述的核苷酸序列或具有序列表中SEQ ID No.3所述的核苷酸序列或具有序列表中SEQ ID No.4所述的核苷酸序列。本发明的人心肌肌钙蛋白I（心肌肌钙蛋白I）适配子与cTn I结合的亲和力高、特异性强，提高了在心肌肌钙蛋白I早期检测和临床心肌损伤的诊断上的应用或应用于心肌肌钙蛋白I的分离纯化的灵敏性。
审查员审查后，第一次审查意见通知书，认为本发明专利申请公开不充分，经本代理人与申请人多次沟通后，并与该审查员进行了多次电话沟通，代理人进行了针对性的答复；审查员又发出了第二次审查意见，仍然认为本发明专利申请公开不充分，然后本代理人与专利申请人及发明人又进行了多次地沟通，由于审查员在对比分析时，关于本专利申请的相关的具体内容了解不是特别充分，包含了一些发明人认为错误的意见，因此得出了错误的结论。为此代理人在第二次审查意见答复时，针对审查意见的问题进行专项陈述，并同时也修改了专利申请文件，后来，申请人发现第二次审查意见进行答复时，还发现仍存在一些问题，因此又主动进行了答复，审查员接受了第二次审查意见及主动进行的答复，该发明专利最终获得发明专利权。
该发明专利最终获得发明专利权。
一通答复正文内容：
尊敬的审查员：您好！
仔细拜读了您的审查意见，申请人不完全同意审查员的审查意见，具体答复如下：
PCR 扩增引物和不对称PCR上下游引物是一样的：
上游引物5′–CGG GAA TTC TAT GGC GGA TGG GAG CAG CGA–3′（序列5，7）
下游引物5′–CGG AAG CTT GCT CTC AAA CTT TTT CTT GCG GC–3′（序列6，8）
上游引物：序列5=序列7；下游引物：序列6=序列8；
PCR 扩增，上下游引物的比例为1：1；
不对称PCR，上下游引物的比例为80：1；
引物中只要有15个碱基与模板DNA碱基相同就可以扩增。引物的设计通常要加入酶切位点这部分通常与模板碱基不同。扩增后的DNA带有酶切位点，如果需要可为下一步的DNA克隆做准备。因此相关技术人员可按本专利的技术做出相应的适配子。
因此，申请人认为本发明专利申请的说明书符合专利法第二十六条第三款的规定。请审查员继续对本专利申请的审查。
二通答复正文：
尊敬的审查员：您好！
仔细拜读了您的审查意见，申请人同意审查员的审查意见，具体修改及答复如下：
修改说明：
将原权利要求1和3删除，并将原权利要求2修改为“所述适配子的的核苷酸序列为：CGG GAA TTC TAT GGC GGA TGG GAG CAG CGA GTT TAC ATC GGG GGT ACA TGC CGC AAG AAA A AG T TT G AG A GC A AG CTT C CG。”，并上升为新的权利要求1，将原权利要求4修改为“权利要求1所述的人心肌肌钙蛋白I适配子应用于心肌肌钙蛋白I的分离纯化”，并上升为新的权利要求2，并引用新修改的权利要求1。
同时，申请人提出如下的意见陈述：
1、关于说明书中记载的序列7及序列8为“不对称PCR技术制备ssDNA次级文库”人扩增引物，在说明书中已经记载了“在不对称PCR中，每管P2（P2指心肌肌钙蛋白I的下游引物）为l pM，P1：P2（P1指心肌肌钙蛋白I的上游引物）引物比”因此，即使在说明书及序列表中均未给出序列7和8的具体核苷酸序列，但是由于心肌肌钙蛋白I的基因为本领域技术人员的公知常识，因此该心肌肌钙蛋白I的的上、下引物的具体的核苷酸序列也为本领域的技术人员的公知常识。
2、关于序列5的所示的上游引物长度为30nt，与随机文库5’端的27nt固定序列长度不同，序列5与随机文库5’端27nt固定序列在3’端存在差异，是由于在序列5的第24个碱基以后增加3个碱基作为酶切位点，最后28、29、30这3个碱基为3’末端，因此由引物序列5经扩增78nt长度的ssDNA文库后能够得到产物长度为81nt的人心肌肌钙蛋白I适配子。而且，增加酶切位点,可以用酶切开,再与载体连接.这样可以储存,也是制备更多已知序列DNA(适配子)的另一种方法。
3、申请人于申请日提交的权利要求书中的原权利要求1要求保护的适配子为产物长度为78nt的适配子，但是原权利要求1中的序列表中的SEQ ID No.1~4中记载的序列的长度明显与二级结构的核苷酸序列存在明显的差异，这是由于申请人在基因序列表中的填写时存在撰写错误，因此现申请人特将权利要求1修改为要求保护正确的序列长度为81nt的适配子，而且保护其核苷酸序列为“CGG GAA TTC TAT GGC GGA TGG GAG CAG CGA GTT TAC ATC GGG GGT ACA TGC CGC AAG AAA A AG T TT G AG A GC A AG CTT C CG”的适配子。
因此，申请人认为本发明专利申请的说明书符合专利法第二十六条第三款的规定。请审查员继续对本专利申请的审查。
感谢审查员老师的认真、辛勤审查。